同位素内标是一种在分析化学中广泛应用的定量分析技术,其核心原理是通过引入与目标分析物化学结构高度相似但含有稳定同位素标记(如²H、¹³C、¹⁵N等)的内标物,校正分析过程中的误差,提升定量准确性。
在样品前处理、色谱分离和质谱检测过程中,目标分析物可能因基质效应、仪器波动、回收率差异等因素导致定量误差。同位素内标物与目标分析物经历相同的处理过程,其响应变化可以反映目标分析物的损失或变化,从而通过比值计算校正误差。
化学结构相似性
同位素内标与目标分析物具有相同的化学结构,仅在部分原子(如氢、碳、氮)上被同位素取代(如氘代氢、¹³C替代¹²C)。这种相似性确保了两者在样品前处理、色谱分离和离子化过程中行为一致。
质谱区分性
由于同位素的质量差异,内标与目标分析物在质谱中产生可区分的离子峰(通常质量差为1-3 Da)。通过比较两者的峰面积或峰高,可消除基质效应、仪器波动等干扰,实现准确定量。
同位素内标的优点
高准确性:
同位素内标物与目标分析物具有相同的化学性质和相似的色谱行为,能够有效校正基质效应和仪器波动,提高定量结果的准确性。
高灵敏度:
质谱分析对同位素标记物的检测具有高灵敏度,适用于痕量分析。
广泛适用性:
同位素内标技术适用于多种分析方法,如液相色谱-质谱联用(LC-MS)、气相色谱-质谱联用(GC-MS)等。
减少基质效应:
基质效应是分析化学中常见的干扰因素,同位素内标物能够模拟目标分析物的行为,有效抵消基质效应的影响。