同位素内标(Isotope-labeled Internal Standard, ILIS)通过引入与目标分析物化学结构高度相似但含有稳定同位素标记(如²H、¹³C、¹⁵N、¹⁸O等)的内标物，校正分析过程中的误差，提升定量准确性。
其核心原理在于，通过改造核酸或蛋白质，将同位素标记的探针引入系统。这些探针能够与生物体内的目标分子结合，利用双向结合的策略，通过专门的分析技术，解析出宿主与同位素的相互作用，揭示出生物体的内在机制和环境响应的秘密。
同位素内标法的步骤清晰而有序：先引入标记有抗体或抗原的同位素探针；接着，经过反应与聚集，形成活性化合物；后仪器准确检测这些反应的强度或细胞表型变化，绘制出反映生物体动态变化的曲线图，为研究提供深度洞见。
同位素内标在生物医学、环境分析、食品安全、临床诊断等领域具有广泛应用，通过校正基质效应和前处理损失，明显提高定量分析的准确性和可靠性。未来，随着同位素标记技术和质谱分析方法的发展，同位素内标将在更多领域发挥关键作用。
注意事项
内标物的验证：需通过色谱保留时间、质谱碎片离子等信息确认内标物与目标分析物的分离效果。
同位素丰度的校正：高丰度的同位素标记可提高定量准确性。
内标浓度的优化：内标浓度应与目标分析物的预期浓度范围相匹配，避免过高或过低导致定量误差。
